作者： 何明旺，项雅婧，孙云，曹贞洁，周永灿 （海南省热带水生生物技术重点实验室；南海海洋资源利用国家重点实验室；热带生物资源教育部重点实验室海南大学海洋学院）

出处： 海南大学学报(自然科学版) 2019 第1期 P34-40

关键词： 卵形鲳鲹；hepcidin-5；原核表达；多克隆抗体

摘要： 为了制备高效的卵形鲳鲹hepcidin-5蛋白多克隆抗体和对其特异性进行鉴定,本研究通过PCR扩增的方法获得了卵形鲳鲹抗菌肽hepcidin-5(Tro H5)的成熟肽cDNA序列,并构建了原核表达载体pET-32a(+)/TroH5,然后将其转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行原核表达.经 ...

作者： 钟志鸿\'王菲\'陈永贵，邓恒为\'王世锋，孙云，陈雪芬，郭伟良\'周永灿， （海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室；海南大学海洋学院海南省热带水生生物技术重点实验室；中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室）

出处： 南方水产科学 2018 第14卷 第6期 P81-88

关键词： 哈维氏弧菌；乌梅；抗生素；响应面分析法；协同抗菌

摘要： 为了给哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）疾病防治新手段的开发提供基础实验数据,筛选了协同抗哈维氏弧菌的乌梅（Fructus mume）水提液与抗生素复合物。首先绘制药物浓度对数对抑菌圈直径标准曲线,采用全组合法筛选与乌梅水提液具有协同抗菌活性的抗生素,然后采用中心组合设计法（CCD）结合响应 ...

作者： 张胜楠，吴莹，孙云，曹贞洁，周永灿 （海南大学海洋学院/海南省热带水生生物技术重点实验室/海南省南海海洋资源利用国家重点实验室）

出处： 热带生物学报 2018 第9卷 第4期 P370-376

关键词： 卵形鲳鲹；蛋白A亲和层析法；免疫球蛋白IgM；多克隆抗体

摘要： 为了获得卵形鲳鲹血清免疫球蛋白(Ig M),笔者首先采用硫酸铵二次盐析法对Ig M进行粗提,然后利用蛋白A亲和层析法进行纯化,并以纯化后的Ig M蛋白为抗原,制备该蛋白的多克隆抗体,最后利用酶联免疫吸附(ELISA)方法和Western blot技术检测所获抗血清的效价及效果。结果表明:用饱和硫酸铵 ...

作者： 张小其，孙云，周永灿，曹贞洁 （南海海洋资源利用国家重点实验室海南大学海洋学院）

出处： 海南大学学报(自然科学版) 2018 第36卷 第2期 P101-109

关键词： 卵形鲳鲹；MHC；Ⅱ类分子；原核表达；多克隆抗体；组织表达

摘要： 为了从蛋白水平和mRNA水平上比较和分析MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况,本研究构建了重组载体p ET32a(+)/M-Ⅱα和p ET32a(+)/M-Ⅱβ来诱导其表达,并制备了多克隆抗体,而且通过qRT-PCR技术分析了MHC Ⅱ类基因在卵形鲳鲹正常组织中的表达.结果显 ...

作者： 刘春胜，顾志峰，邢孟欣，孙云，陈四清，陈昭廷 （State Key Laboratory of Marine Resource Utilization in South China Sea， Hainan University， Haikou 570228， China；Key Laboratory of Tropical Hydrobiogical Technology， Ocean College， Hainan University， Haikou 570228， China；Yellow Sea Fisheries Research Institute， ChineseAcademy of Fishery Sciences， Qingdao 266071， China）

出处： 海洋湖沼学报(英文) 2018 第36卷 第2期 P457-464

关键词： Aurelia；sp.1；sex；determination；temperature；sex；differentiation

摘要： Cnidarians, being regarded as ＇basal＇ metazoan animals, are considered to have relatively high plasticity in terms of sex reversal. In this study we u ...

作者： 郭伟良，陈永贵，邓恒为，钟志鸿，王菲，王世锋，孙云，陈雪芬，周永灿 （海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室；海南大学海洋学院海南省热带水生生物技术重点实验室；中山大学生命科学学院）

出处： 水产科学 2018 第37卷 第6期 P735-741

关键词： 哈维氏弧菌；中草药；抗生素；响应面法

摘要： 哈维氏弧菌是海水养殖动物主要病原菌之一。采用化学计量学方法筛选体外协同抗哈维氏弧菌的中草药水提液与抗生素。首先采用琼脂扩散法筛选体外具有抗哈维氏弧菌的中草药水提液,然后采用全组合方法筛选与中草药水提液体具有体外协同抗哈维氏弧菌的抗生素,再采用中心组合设计试验结合响应面法,考察中草药水提液与多种具有协 ...

发明人： 孙云，周永灿，雷阳，刘春胜，曹贞洁，王世锋，郭伟良

申请人： 海南大学

申请号： 201811521428.5

申请日期： 2018.12.13

摘要： 本发明涉及一种布氏鲳鲹抗菌肽基因及其编码的肽和原核表达制备方法，属水生动物免疫技术领域，所述基因如SEQ NO.1所示，所述基因编码的布氏鲳鲹抗菌肽的氨基酸序列如SEQ NO.2所示。本发明还提供了布氏鲳鲹抗菌肽TroLEAP‑2原核表达及其制备方法，载体为大肠杆菌DH5α感受态细胞，用于重组的菌株 ...

发明人： 郭伟良，周永灿，王菲，钟志鸿，王世锋，孙云

申请人： 海南大学

申请号： 201810054494.X

申请日期： 2018.01.19

摘要： 本发明属于水产动物细菌性疾病防控领域，涉及一种琥珀酸在制备水产动物链球菌病防治药物中的用途，公开了琥珀酸在抑制罗非鱼源无乳链球菌β‑溶血/溶细胞素的活性，并将其应用于制备防治水产养殖动物细菌性疾病药物，尤其是罗非鱼无乳链球菌病的防控药物，具有显著的疗效，琥珀酸为三羧酸循环中间产物，也是厌氧代谢的发酵 ...

发明人： 郭伟良，周永灿，王菲，钟志鸿，王世锋，孙云

申请人： 海南大学

申请号： 201810054493.5

申请日期： 2018.01.19

摘要： 本发明属于水产动物细菌性疾病防控领域，涉及一种黄芩苷在制备水产动物链球菌病防治药物中的用途，公开了黄芩苷在抑制罗非鱼源无乳链球菌β‑溶血/溶细胞素的活性，并将其应用于制备防治水产养殖动物细菌性疾病药物，尤其是罗非鱼无乳链球菌病的防控药物，具有显著的疗效，黄芩苷是从双子叶唇形科植物黄芩的干燥根中提取分 ...

作者： 郭伟良，吴梦晓，胡文婷，王世锋，孙云，周永灿 （南海海洋资源利用国家重点实验室；海南省热带水生生物和生物技术重点实验室海南大学海洋学院；热带生物资源教育部重点实验室）

出处： 海南大学学报(自然科学版) 2018 第36卷 第2期 P164-172

关键词： 无乳链球菌；温度；抗菌药；药物敏感性

摘要： 为研究温度对罗非鱼无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)抗菌药物敏感性的影响,以无乳链球菌CICC10465及4株从海南分离的罗非鱼无乳链球菌作为供试菌,采用显微计数法测定了供试菌在25,30和37℃下培养18 h后的菌体浓度,并采用NCCLS药敏纸片法测定了21种抗菌药物在 ...